Zawartość

• Do kroku
• Część 1 z 2: Sprawdzanie kalibracji
• Część 2 z 2: Obliczanie wyników

Pipeta to rodzaj sprzętu laboratoryjnego służącego do odmierzania i przenoszenia bardzo małych ilości cieczy. Dokładność i precyzja pomiaru pipetą są niezbędne, ponieważ wszelkie odchylenia w dostarczanych objętościach mogą wpływać na wyniki eksperymentu. Aby zapewnić dokładność, należy co kilka miesięcy sprawdzać kalibrację pipety. Proces kalibracji pomaga zweryfikować, czy sprzęt dozuje prawidłowe objętości, tak aby można go było przywrócić, jeśli tak nie jest.

Do kroku

Część 1 z 2: Sprawdzanie kalibracji

1. Zbierz niezbędne materiały. Do sprawdzenia kalibracji pipety potrzebna jest pipeta, końcówki pipety, woda destylowana, zlewka, termometr, waga i szalki. Waga musi być specyficzna dla mikrogramów, aby móc skalibrować mikropipety o maksymalnej zawartości 1 µl.
   • Nie potrzebujesz więcej niż 5 ml wody. Napełnij kubek wodą.
   • Upewnij się, że końcówki pipety są dobrze dopasowane.
2. Zmierz temperaturę wody destylowanej. Umieść termometr w wodzie i pozostaw go na co najmniej jedną minutę. Jeśli czerwona linia na termometrze nadal się porusza, pozostaw ją na kolejną minutę. Po minucie zapisz temperaturę w notatniku. Po zakończeniu wyjmij termometr i wysusz go.
   • Temperatura wody jest ważna dla obliczeń wykonywanych w celu sprawdzenia kalibracji.
3. Umieść wagę na wadze i ustaw ją na zero. Idealnie byłoby użyć wagi do drzwi i izolowanego pomieszczenia. Umieść miskę w pokoju i zamknij drzwi. Jeśli nie ma drzwi, po prostu umieść miskę na wadze. Nacisnąć przycisk „Zero” lub „Tara” i poczekać, aż waga odczyta zero.
   • Ustawiając wagę na zero, waga plastikowej miski nie jest brana pod uwagę i staje się możliwe zmierzenie tylko wagi tego, co włożysz do miski.
4. Przygotuj pipetę do kalibracji. Przed rozpoczęciem przetrzyj pipetę etanolem, aby zabić wszelkie zanieczyszczenia - dodatkowo upewnij się, że końcówka pipety nie została zatkana. Umieść odpowiednią końcówkę na końcu i ustaw objętość, którą chcesz przetestować.
   • Przed kalibracją należy przetestować zarówno najmniejszą, jak i największą objętość, jaką pipeta może dozować.
5. Przepłucz końcówkę przed kalibracją. Wciśnij przycisk do pierwszego oporu i włóż końcówkę do wody destylowanej tak, aby około 2 mm jej było zanurzone w cieczy. Zwolnij przycisk, aby pobrać trochę płynu, a następnie ponownie dozuj płyn, naciskając przycisk w dół. Powtórz to trzy razy, aby przepłukać końcówkę.
   • Wciśnij przycisk do drugiego ogranicznika, aby dozować pozostałą ciecz w końcówce i wyjmij pipetę z wody.
6. Sporządzić objętość kalibracyjną. Po wyjęciu końcówki z cieczy wciśnij przycisk do pierwszego oporu. Umieść około 2 mm od końcówki w wodzie destylowanej i zwolnij przycisk, aby wciągnąć płyn do końcówki. Odczekaj około sekundy przed wyjęciem końcówki z wody.
   • Upewnij się, że końcówka jest całkowicie zanurzona podczas całego procesu aspiracji. Nie chcesz bąbelków na końcówce lub wynik nie będzie prawidłowy.
7. Dozuj płyn do miski na wadze. Umieść końcówkę na dnie miski i wciśnij przycisk do pierwszego oporu. Przejdź w inne miejsce, nieco oddalone od wody i wciśnij przycisk do drugiego przystanku. Przytrzymaj przycisk i unieś czubek miski.
   • Trzymaj końcówkę na pipecie, ponieważ będziesz jej ponownie używać do wykonywania kolejnych testów kalibracyjnych. Upewnij się, że końcówka niczego nie dotyka.
8. Zapisz wagę, która wskazuje równowagę. Zamknij drzwi, jeśli używasz wagi w izolowanym pomieszczeniu. Poczekaj, aż wartości przestaną się zmieniać. Zapisz tę wartość w swoim notatniku.
   • Ważne jest, aby przed zapisaniem poczekać, aż liczba się ustabilizuje. Twoje odczyty będą błędne, jeśli nie będziesz czekać.
9. Powtarzaj ten proces, aż wykonasz co najmniej 10 pomiarów. Ustaw wagę na zero, przepłucz końcówkę, nabrać taką samą objętość, dozować objętość, a następnie zanotować wagę. Potrzebujesz wielu nagrań o tej samej głośności, a następnie możesz wziąć razem średnią ze wszystkich nagrań.
   • Możesz powtórzyć ten sam proces z różnymi objętościami, o ile wykonujesz wiele pomiarów na objętość.

Część 2 z 2: Obliczanie wyników

1. Użyj wzoru na obliczoną objętość. Wzór na obliczenie objętości dostarczonej przez pipetę to V = w * Z, gdzie w to masa wody, Z to współczynnik przeliczeniowy oparty na gęstości wody, a V to obliczona objętość ilości wody tam jest przekazany.
   • Zmienną Z można znaleźć, sprawdzając gęstość wody na podstawie temperatury zarejestrowanej na początku eksperymentu.
   • Na przykład: Jeśli temperatura wody wynosiła 23 ° C, to przyjmujesz wartość Z wynoszącą 1,0035 µg / mg.
2. Obliczyć średnią z powtarzanych prób. Należy co najmniej 10 razy zważyć objętość wody pobranej przez pipetę. Aby obliczyć średnią ze wszystkich tych wartości, zsumuj je i podziel przez 10. Jeśli wykonałeś więcej lub mniej prób, dodaj każdą próbę i podziel sumę przez całkowitą liczbę prób.
   • Na przykład: dziesięć zarejestrowanych wag dla pipety o objętości 10 µl to: 9,89, 10,01, 10,02, 9,99, 9,95, 10,04, 9,96, 10,01, 9,99 i 9,98.
   • Średnia wynosi: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95 + 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98) / 10 = 99, 84/10 = 9,984
3. Zastosuj zmienne do równania i rozwiąż je. Po określeniu prawidłowych wartości dla każdej zmiennej można włączyć je do równania i obliczyć objętość. Aby rozwiązać ten problem, po prostu pomnóż średnią wagę wszystkich testowanych wartości przez wartość Z.
   • Na przykład: V = w * Z = 9,984 * 1,0035 = 10,019
4. Oblicz dokładność pipety. Aby obliczyć dokładność, możesz użyć równania A = 100 x V._śr/ V₀ gdzie A to precyzja pipety, V._śr średnią obliczoną objętość i V.₀ wartość ustawioną dla pipety. Dokładność musi zawierać się w przedziale 99–101%.
   • Jeśli pipeta jest prawidłowo skalibrowana, obliczona wartość powinna być bardzo zbliżona do rzeczywistej wartości ustawionej na pipecie.
   • Na przykład: A = 100 x V_śr/ V₀ = 100 x 10,019 / 10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
   • Ta pipeta jest prawidłowo skalibrowana.
5. W razie potrzeby wyślij pipetę do kalibracji. Jeśli Twoja pipeta nie przejdzie testu kalibracji, natychmiast przestań jej używać do eksperymentów. Pipety to bardzo delikatne i drogie części wyposażenia laboratoryjnego. Nie możesz samodzielnie naprawić kalibracji, więc będziesz musiał ją wysłać do właściwej konserwacji. Alternatywnie, niektóre firmy przyjdą do twojego laboratorium i tam skalibrują twoje pipety.
   • W celu konserwacji skontaktuj się z firmą produkującą konkretną markę pipety.